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雞腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒

簡要描述:

雞腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒
使用目的:
為定量(性)測定活化的目標(biāo)濃度的血清,血漿,組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清及其他生物液體。研究使用不是用于診斷或治療程序。
如果你有任何問題,請上海義森生物科技有限公司。

更新時間:2024-09-07

雞腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒

試劑盒組成

1

20倍濃縮洗滌液

20ml×1

7

終止液

3ml×1

2

酶標(biāo)試劑

3ml×1

8

標(biāo)準品(960μg/L

0.5ml×1

3

標(biāo)包被

12孔×4

9

標(biāo)準品稀釋液

1.5ml×1

4

樣品稀釋液

3ml×1

10

說明書

1

5

顯色劑A

3ml×1

11

封板膜

2張  

6

顯色劑B

3ml×1/

12

密封袋

1

標(biāo)本要求 

1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

操作步驟

1. 標(biāo)準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

480μg/L

5號標(biāo)準品

150μl的原倍標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液

240μg/L

4號標(biāo)準品

150μl5號標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液

120μg/L

3號標(biāo)準品

150μl4號標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液

60μg/L

2號標(biāo)準品

150μl3號標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液

30μg/L

1號標(biāo)準品

150μl2號標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   

4. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。 

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)

11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止

雞腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒

計算

 以標(biāo)準物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準物的濃度與OD值計算出標(biāo)準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。 

 注意事項

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。

3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

4. 請每次測定的同時做標(biāo)準曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物請避光保存。

7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準.

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9.本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。

保存條件及有效期

1試劑盒保存:;2-8。

2.有效期:6個月

 

 

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